Effect of an immunomodulating agent used in cows during the dry period on blood parameters of newborn calves

Full Text

Введение. В условиях промышленного молочного скотоводства устойчивость хозяйства во многом определяется сохранностью молодняка в раннем постнатальном периоде, причём заболевания желудочно-кишечного тракта сохраняют ведущую роль в структуре патологии новорождённых и сопровождаются выраженными экономическими потерями. Ю. В. Калинкина подчёркивает постоянство экономического ущерба при неонатальной гастроэнтеральной патологии телят за счёт потерь продуктивности, падежа и затрат на лечение и профилактику, что делает профилактическую направленность исследований методически оправданной [1]. В прикладном аспекте К. А. Воронова и Л. В. Клетикова связывают высокую частоту диспепсии на комплексах с низкой адаптивной способностью организма молодняка и указывают, что технологические ошибки выращивания и кормления проявляются не только клинически, но и через изменения гематологического профиля, включая интегральные показатели крови как маркеры интоксикации и адаптационного потенциала [2].

Принципиальной особенностью неонатального периода у телят является отсутствие трансплацентарной передачи материнских иммуноглобулинов вследствие барьерной функции синепителиохориальной плаценты, что определяет рождение телят в состоянии агаммаглобулинемии и критическую зависимость от колострального иммунитета. Эта позиция в современной отечественной литературе формализована Ю. Н. Фёдоровым с соавторами, которые прямо указывают на отсутствие плацентарной передачи антител, рождение телят без иммуноглобулинов и ключевую роль поступления иммуноглобулинов через молозиво в первые 24 часа жизни для устойчивости к патогенам и выживаемости [3]. При этом окно эффективной абсорбции макромолекул ограничено: С. С. Терентьев обобщает данные о том, что всасывание иммуноглобулинов у новорождённых телят протекает лишь в первые сутки и особенно активно в первый час жизни, после чего энтероциты утрачивают способность к поглощению макромолекул, что придаёт особую значимость раннему менеджменту молозива [4, 5]. Дополнительно А. И. Живодёрова с соавторами в производственных наблюдениях подчёркивают быстрое снижение способности телёнка усваивать иммуноглобулины уже через 6 часов после рождения и необходимость выпойки молозива в первые часы жизни как условия формирования устойчивого кишечного иммунитета [6].

На этом фоне возрастает значение антенатальных факторов, формирующих исходный адаптационный «фон» телёнка ещё до поступления молозивных иммуноглобулинов, поскольку жизнеспособность потомства напрямую связана с физиологическим состоянием коровы-матери в поздний период стельности [4]. С позиции патогенетической логики сухостойный период рассматривается как критический этап, на котором у коров нередко формируются нарушения обмена веществ и окислительный стресс, требующие целенаправленной коррекции для стабилизации окислительно-восстановительных процессов и повышения резистентности, включая резистентность приплода [7, 8]. В качестве одного из вариантов антенатальной иммунометаболической поддержки описан иммуномодулятор «Иммунофарм»: В. Н. Ласкавый с соавторами характеризуют препарат как раствор альдегида муравьиной кислоты в изотоническом растворе хлорида натрия, приводят состав по патенту и указывают заявляемые эффекты иммуномодуляции и нормализации клеточного состава крови и гемоглобина, а также усиления окислительно-восстановительных процессов. Практическую применимость подходов, основанных на воздействии в сухостойный период биологически активными средствами, поддерживают и данные о влиянии иммуномодулятора на метаболические показатели у коров в сухостойный период с последующей оценкой биохимического статуса и связанных производственных параметров [9, 10].

Цель исследований – оценить влияние применения иммуномодулирующего средства у коров в сухостойный период на морфологические и биохимические показатели крови новорождённых телят.

Задача исследований – провести сравнительный анализ морфологических и биохимических показателей крови телят, полученных от коров контрольной и подопытной групп, в первый час жизни до выпойки молозивом.

Материал и методы исследований. Экспериментальная работа выполнялась в производственных условиях АО «Купинское». В качестве основного профилактического средства использовали иммуномодулирующее средство, созданное на основе муравьиного альдегида (патент РФ №2077882 А61КЗ1115, Ласкавый В.Н., Рыбин В.В., 1997). Препарат представляет собой бесцветную жидкость без выраженного запаха и содержит активное вещество – муравьиный альдегид в концентрации 0,07-0,24%, хлорид натрия – 0,90-0,95% и дистиллированную воду.

Для проведения исследования были сформированы две группы стельных коров: контрольная (n=20) и подопытная (n=80). Животных распределяли по принципу пар-аналогов с учётом возраста, живой массы, лактационного статуса и срока стельности. Все группы в ходе эксперимента находились в одинаковых зоотехнических условиях содержания и кормления по технологии, принятой в хозяйстве для сухостойного отделения.

Коровам опытной группы иммуномодулирующее средство вводили внутримышечно за 25-30 суток до предполагаемой даты отёла трёхкратно с интервалом 7 суток в дозе 6 мл. Коровам контрольной группы вводили 0,9% раствор NaCl внутримышечно по идентичной кратности, срокам и объёму введения.

По полученному приплоду коров формировались следующие группы телят: подопытная (n=75) от коров, которым вводили иммуномодулирующее средство в период сухостоя, и контрольная (n=15) от коров, которым вводили 0,9% раствор NaCl. Кровь отбирали в подопытной группе у 20 телят, в контрольной – у 5 телят. Телята подбирались по принципу пар-аналогов с соблюдением однородности по полу (самки) и живой массе при рождении (35-40 кг), при одинаковых условиях содержания и выпойки. Отбор крови у телят проводили в первый час жизни до выпойки молозивом. Кровь для общего анализа отбирали в вакуумные пробирки с антикоагулянтом ЭДТА (К3), для биохимического исследования – с активатором образования сгустка. Исследование включало общий анализ крови и биохимическое исследование с оценкой показателей.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием методов вариационной статистики с использованием программного комплекса Microsoft Excel. Для оценки достоверности различий между контрольной и опытной группами применяли двухвыборочный t-критерий Стьюдента для независимых выборок.

Результаты исследований. При исследовании крови телят в первый час жизни до выпойки молозивом установлено, что большинство изученных морфологических и биохимических показателей находилось на сопоставимом уровне, однако по ряду параметров, отражающих направленность ранних адаптационных реакций, выявлены достоверные межгрупповые различия (табл. 1-2). В среднем по всем телятам (n=25) значения основных показателей соответствовали физиологически ожидаемому профилю раннего неонатального периода.

 

Таблица 1

Морфологические показатели крови телят в первый час жизни

Показатель	На 1 день жизни
	Группы животных
	Контрольная (n=5)	Подопытная (n=20)
Эритроциты, 10¹²/л	7,71 ± 0,44	7,90 ± 0,29
Гемоглобин, г/л	74,82 ± 2,19	77,62 ± 2,07*
Гематокрит, %	30,78 ± 2,55	31,65 ± 1,65
Средний объем эритроцитов, фл	39,72 ± 2,26	40,12 ± 1,41
Ср. сод. гемоглобина в эритроците, пг	9,64 ± 0,77	9,84 ± 0,49
Ср. конц. гемоглобина в эритроците, г/л	242,14 ± 11,88	245,56 ± 7,61
Индекс распределения эритроцитов, %	16,98 ± 0,78	16,70 ± 0,51
Тромбоциты, 10⁹/л	375,18 ± 16,25	395,39 ± 13,00**
Средний объем тромбоцитов, фл	7,38 ± 0,31	7,47 ± 0,20
Ширина распределения тромбоцитов, %	15,62 ± 0,85	15,49 ± 0,53
Тромбокрит, %	0,278 ± 0,006	0,293 ± 0,008***
Лейкоцитарная формула
Абсолютное содержание лейкоцитов, 10⁹/л	10,64 ± 0,41	10,49 ± 0,27
Лимфоциты, %	27,06 ± 4,31	33,36 ± 4,08**
Моноциты, %	6,18 ± 2,59	5,71 ± 1,62
Базофилы, %	0,31 ± 0,43	0,37 ± 0,27
Эозинофилы, %	0,72 ± 0,96	1,37 ± 0,72
Нейтрофилы, %, в т.ч.	65,72 ± 4,62	59,20 ± 4,37**
∟ Юные	0,84 ± 0,66	0,54 ± 0,45
∟ Палочкоядерные	7,08 ± 3,08	5,73 ± 2,07
∟ Сегментоядерные	57,80 ± 5,02	52,93 ± 4,32*

Примечание: Р< 0,05*; -Р< 0,01**; -Р< 0,001*** по сравнению с результатами исследований контрольной группы.

 

Таблица 2

Биохимические показатели крови телят в первый час жизни

Показатель	Группы животных
	Контрольная (n=5)	Подопытная (n=20)
Общий белок, г/л	44,66 ± 4,11	48,66 ± 3,81*
Альбумин, %	71,24 ± 03,27	69,83 ± 02,96
Глобулины, %, в т.ч.	28,76 ± 03,41	30,17 ± 03,04
∟ α-глобулины	16,92 ± 01,92	19,48 ± 01,88*
∟ β-глобулины	10,89 ± 01,62	09,76 ± 01,39
∟ γ-глобулины	00,95 ± 00,32	00,93 ± 00,33
Глюкоза, ммоль/л	2,58 ± 0,71	3,26 ± 0,65*
Диоксид углерода, ммоль/л	20,43 ± 1,99	22,57 ± 1,69*
Мочевина, ммоль/л	3,83 ± 0,76	3,32 ± 0,57
Креатинин, мкмоль/л	220,06 ± 36,51	213,14 ± 35,66
Мочевая кислота, мкмоль/л	9,59 ± 2,22	9,08 ± 1,67
Общий билирубин, мкмоль/л	5,36 ± 1,27	5,06 ± 1,12
Общие желчные кислоты, мкмоль/л	9,11 ± 2,69	8,52 ± 2,01
Аланинаминотрансфераза (АЛаТ), нкат/л	251,33 ± 38,00	202,50 ± 47,00*
Аспартатаминотрансфераза (АСаТ), нкат/л	843,67 ± 142,67	655,00 ± 136,50*
Гамма-лутамилтрансфераза, нкат/л	453,76 ± 117,69	436,09 ± 115,69
Щелочная фосфатаза, нкат/л	3573,00 ± 956,00	3582,33 ± 916,83
Амилаза, нкат/л	876,51 ± 247,72	881,84 ± 208,21
Липаза, нкат/л	281,56 ± 50,68	282,39 ± 56,01
Лактатдегидрогеназа, нкат/л	10702,81 ± 2852,74	10084,52 ± 2446,82
Креатинкиназа, нкат/л	6287,59 ± 3363,01	5901,18 ± 2830,57
Холестерин общий, ммоль/л	0,91 ± 0,24	0,99 ± 0,21
Триглицериды, ммоль/л	0,28 ± 0,09	0,26 ± 0,08
Кальций, ммоль/л	2,18 ± 0,15	2,37 ± 0,08**
Фосфор неорганический, ммоль/л	2,23 ± 0,18	2,26 ± 0,14

Примечание: Р< 0,05*; -Р< 0,01**; -Р< 0,001*** по сравнению с результатами исследований контрольной группы.

 

По показателям красной крови у телят подопытной группы отмечалось более благоприятное направление изменений по сравнению с контролем. Так, концентрация гемоглобина была выше контрольных значений на 3,7% и составила 77,62 г/л против 74,82 г/л (Р< 0,05). При этом число эритроцитов и гематокрит оставались сопоставимыми в сравниваемых группах и составили соответственно 7,90×10¹²/л и 31,65% в подопытной группе, при 7,71×10¹²/л и 30,78% в контрольной. Эритроцитарные индексы, включая средний объём эритроцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците, среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците и индекс распределения эритроцитов, существенных различий не демонстрировали, что указывает на отсутствие выраженной перестройки морфогенеза эритроцитов в доколостральный период.

Наиболее отчётливые межгрупповые различия установлены в тромбоцитарном звене. У телят подопытной группы число тромбоцитов превышало контрольные значения на 5,4% и составило 395,39×10⁹/л против 375,18×10⁹/л (Р< 0,01). Тромбокрит также был выше контроля на 5,4% и составил 0,293% против 0,278% (Р< 0,001). При этом средний объём тромбоцитов и ширина распределения тромбоцитов оставались сопоставимыми в обеих группах, что позволяет рассматривать выявленные изменения как количественную направленность гемостатического компонента без признаков выраженной вариабельности.

В лейкоцитарной формуле подопытной группы зарегистрированы достоверные изменения, характеризующие меньшую выраженность нейтрофильной мобилизации на фоне относительного усиления лимфоцитарного компонента. Доля лимфоцитов у телят подопытной группы была выше контрольной на 23,3% и составила 33,36% против 27,06% (Р< 0,01). Одновременно доля нейтрофилов была ниже контроля на 9,9% и составила 59,20% против 65,72% (Р< 0,01). В структуре нейтрофильного звена снижение затронуло преимущественно сегментоядерные формы, доля которых в подопытной группе была ниже контрольной на 8,4% и составила 52,93% против 57,80% (Р< 0,05). Абсолютное содержание лейкоцитов, доля моноцитов, базофилов и эозинофилов достоверных различий не имели. В совокупности полученная картина лейкограммы соответствует более «спокойному» варианту стартовой стресс-адаптационной реакции у телят.

Биохимические показатели крови в целом подтверждают, что изменения затрагивали прежде всего белковый и энергетический компоненты обмена, а также отдельные ферментные маркеры. У телят подопытной группы концентрация общего белка была выше контрольной на 9,0% и составила 48,66 г/л против 44,66 г/л (Р< 0,05). При этом доля альбуминов и суммарных глобулинов в процентах существенно не различалась, однако внутри глобулиновой фракции выявлено увеличение доли альфа-глобулинов на 15,1% до 19,48% против 16,92% (Р< 0,05), что указывает на направленность к более выраженному белковому обеспечению ранней адаптации без грубых сдвигов соотношения основных белковых фракций.

Показатели энергетического и буферного статуса также характеризовались достоверными межгрупповыми различиями. Концентрация глюкозы у телят подопытной группы превышала контрольные значения на 26,4% и составила 3,26 ммоль/л против 2,58 ммоль/л (Р< 0,05), что может расцениваться как более стабильное энергетическое обеспечение в доколостральный период. Содержание диоксида углерода было выше контроля на 10,5% и составило 22,57 ммоль/л против 20,43 ммоль/л (Р< 0,05), что отражает более сохранённый буферный потенциал и меньшую выраженность к метаболическому ацидозу в ранней постнатальной адаптации. Показатели азотистого обмена, включая мочевину и креатинин, достоверных различий не имели, несмотря на направленность к более низким значениям в подопытной группе.

В ферментном профиле установлено снижение активности трансаминаз у телят подопытной группы. Активность аланинаминотрансферазы была ниже контрольной на 19,4% и составила 202,50 нкат/л против 251,33 нкат/л (Р< 0,05). Активность аспартатаминотрансферазы была ниже контроля на 22,4% и составила 655,00 нкат/л против 843,67 нкат/л (Р< 0,05). При сопоставимых значениях гамма-глутамилтрансферазы, щелочной фосфатазы, амилазы, липазы, лактатдегидрогеназы и креатинкиназы данная направленность трансаминаз может рассматриваться как признак меньшей ферментативной напряжённости и более физиологичного характера тканевой адаптации в первые часы жизни. В минеральном профиле выявлено повышение концентрации кальция у телят подопытной группы на 8,7% до 2,37 ммоль/л против 2,18 ммоль/л (Р< 0,01), при отсутствии межгрупповых различий по неорганическому фосфору.

Заключение. Применение иммуномодулирующего средства на основе муравьиного альдегида у коров в сухостойный период сопровождалось формированием у новорождённых телят, при исследовании крови в первый час жизни до выпойки молозивом, комплекса направленных и статистически подтверждённых изменений, отражающих более благоприятный характер ранней перинатальной адаптации: установлено повышение концентрации гемоглобина до 77,62 г/л при 74,82 г/л в контроле, усиление тромбоцитарного звена с увеличением числа тромбоцитов до 395,39×10⁹/л и тромбокрита до 0,293% по сравнению с контрольными значениями 375,18×10⁹/л и 0,278%, а также сдвиг лейкоцитарной формулы в сторону преобладания лимфоцитарного компонента на фоне меньшей нейтрофильной мобилизации, что проявлялось увеличением доли лимфоцитов до 33,36% и снижением доли нейтрофилов до 59,20±% с уменьшением сегментоядерных форм до 52,93% относительно контроля 27,06%, 65,72% и 57,80%; по биохимическим показателям выявлено повышение общего белка до 48,66 г/л и доли альфа-глобулинов до 19,48% при одновременном увеличении концентрации глюкозы до 3,26 ммоль/л и содержания диоксида углерода до 22,57 ммоль/л, снижение активности аланинаминотрансферазы до 202,50 нкат/л и аспартатаминотрансферазы до 655,00 нкат/л, а также повышение концентрации кальция до 2,37 ммоль/л по сравнению с контрольными значениями 44,66 г/л, 16,92%, 2,58 ммоль/л, 20,43 ммоль/л, 251,33 нкат/л, 843,67 нкат/л и 2,18 ммоль/л; при этом большинство остальных морфологических и биохимических показателей сохранялось на сопоставимом уровне, что в совокупности позволяет рассматривать применение иммуномодулирующего средства коровам-матерям в сухостойный период как фактор, потенциально повышающий жизнеспособность телят и снижающий предрасположенность к диспепсическим расстройствам в раннем неонатальном периоде.

About the authors

Ilya S. Lapin

Samara State Agrarian University

Email: ilyal.ru@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8341-7543

graduate student

Russian Federation, Ust-Kinelsky, Samara Region

Murat Kh. Baimishev

Samara State Agrarian University

Author for correspondence.
Email: baimishev_m@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3350-3187

Doctor of Veterinary Sciences, Professor

Russian Federation, Ust-Kinelsky, Samara Region

References

Supplementary files