IMMUNOLOGICAL COW’S STATUS DEPENDING ON AN IMMUNOMODULATING AGENT DOSAGE

Full Text

В настоящее время при промышленном ведении молочного животноводства одним из основных факторов, сдерживающих его эффективность, является снижение репродуктивной функции коров [1, 10, 11, 12]. За последние годы достигнуты значительные успехи в области изучения и внедрения новых методов профилактики послеродовых заболеваний у животных. Однако дальнейший поиск эффективных средств предупреждения нарушения морфофункционального, иммунологического статуса и функции размножения у высокопродуктивных коров остается весьма актуальным [2, 3, 4, 5, 6]. Ряд исследователей считают, что для профилактики послеродовых осложнений коров наиболее надежным и физиологически оправданным является применение различных иммуномодуляторов, среди которых особый интерес представляют тканевые и органические иммуномодуляторы [8, 9]. Применение иммуномодуляторов основано на использовании существующей в организме универсальной системы биорегуляции метаболизма, защитного механизма организма, посредством взаимодействия клеток иммунной, нервной и эндокринной систем [7, 9]. В связи с чем изучение влияния разных доз органического иммуномодулирующего средства на показатели структуры крови, естественной резистентности организма высокопродуктивных коров до и после родов актуально. Цель исследований - повышение иммунологического статуса высокопродуктивных коров до и после родов. Задачи исследований - изучить морфологический состав крови (лейкоформула) коров исследуемых групп до и после родов; определить влияние разных доз иммуномодулирующего средства на морфологический состав крови и на показатели естественной резистентности организма коров. Материалы и методы исследований. Исследования проводились на коровах голштинской породы в условиях ГУП СО «Купинское» Самарской области. После перевода коров в сухостойный период с учетом их молочной продуктивности (более 8000 кг), лактации, живой массы, линейной принадлежности было сформировано 4 группы по 10 голов в каждой (контрольная, опытная-1, опытная-2, опытная-3). Для определения влияния иммуномодулятора органического происхождения на показатели крови и естественную резистентность организма коров использовали иммуномодулирующее средство (В. Н. Ласкавый, В. В. Рыбин, патент РФ №2077882 А61К31115) [7]. Иммуномодулирующее средство (бесцветная жидкость без запаха) - препарат, содержащий в виде активного начала формальдегид - 0,07-0,24%, натрий хлор - 0,90-0,95%, дистиллированную воду. Препарат обладает способностью усиливать функцию стволовых клеток костного мозга и стимулировать жизненно важные функции организма за счет воздействия на клеточный иммунитет, кроветворение, обменные энергетические процессы. Иммуномодулирующее средство вводили коровам опытных групп за 25-30 дней до родов внутримышечно с интервалом в 7 дней трехкратно и через 8-12 часов после родов однократно (опытная-1 - 4,0 мл; опытная-2 - 6,0 мл; опытная-3 - 8,0 мл). Животным контрольной группы иммуномодулирующее средство не инъецировали. В процессе исследований за 25-30 дней до родов, за 5 дней до родов и через 5 дней после отела у 5 коров из каждой группы брали кровь из хвостовой вены, используя систему «Моновет», в одно и то же время суток (за 2 часа до кормления) в два контейнера: первый контейнер (содержал гепарин) - для проведения морфологических исследований; второй контейнер - для проведения исследования сыворотки крови (показатели естественной резистентности). Морфологический состав крови изучали подготовкой мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Подсчет форменных элементов крови проводили методом цифровой микроскопии по В. А. Дубровскому. Фагоцитарную активность нейтрофилов крови устанавливали по методу А. И. Иванова и Б. А. Чухворина. В качестве тест-культуры использовали E. Colli O111, выращенную в течение суток на мясопептонном агаре (МПА). Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по методу О. В. Бухарина, В. Л. Созыкина с использованием тест-культуры O111. Лизоцимную активность устанавливали по О. В. Бухарину с применением суточной культуры Micrococcus Luteus (штамм 2655 ГКИ им. Л.А. Тарасевича). Цифровой материал проведенных исследований был обработан методом биометрической вариационной статистики по определению степени достоверности разницы сравниваемых показателей с использованием критерия Стьюдента, принятом в биологии и зоотехнии, с применением программного комплекса Microsoft Excel 10. Степень достоверности отражена соответствующими значениями: Р<0,05 *; P<0,01 **; Р<0,001 ***. Результаты исследований. Изучением морфологической структуры крови (лейкограмма) и показателей естественной резистентности организма коров (фагоцитарная активность нейтрофилов, бактерицидная активность, лизоцимная активность) установлено, что их градиенты зависят от физиологического состояния коров (до родов и после родов), а также от дозы введения внутримышечно иммуномодулирующего средства (табл. 1, 2, 3). Таблица 1 Морфологический состав крови коров исследуемых групп Форменные элементы крови, % За 25-30 дней до отела За 5 дней до отела Группа животных контрольная опытная-1 опытная-2 опытная-3 Базофилы 1,90±0,08 1,80±0,06 1,60±0,07 1,20±0,05 1,60±0,05 Эозинофилы 4,25±0,09 4,00±0,08 3,80±0,06 3,00±0,01 3,60±0,03 Нейтрофилы: юные 2,4±0,13 1,40±0,06 1,20±0,07 0,60±0,04 0,80±0,03 палочкоядерные 4,28±0,18 3,20±0,10 3,00±0,01 1,00±0,05 1,40±0,06 сегментоядерные 31,8±0,72 30,20±0,80 31,00±0,64 35,20±0,52 33,60±0,48 Лимфоциты 48,65±0,84 56,00±0,82 56,20±0,76 53,60±0,63 54,60±0,26 Моноциты 2,95±0,07 2,80±0,06 3,20±005 4,80±0,05 4,40±0,06 Таблица 2 Морфологические показатели крови через 5 дней после отела Форменные элементы крови, % Группы животных контрольная опытная-1 опытная-2 опытная-3 Базофилы 1,40±0,66 1,60±0,04 1,20±0,05 1,20±0,05 Эозинофилы 5,00±0,04 4,60±0,64 3,20±0,06 3,40±0,04 Нейтрофилы: юные 2,00±0,02 1,60±0,03 0,80±0,04 0,80±0,05 палочкоядерные 4,20±0,06 3,80±0,08 2,20±0,06 2,40±0,04 сегментоядерные 28,40±0,72 29,60±0,69 34,20±0,58 34,40±0,55 Лимфоциты 56,60±1,80 56,20±1,96 54,00±1,08 53,60±1,14 Моноциты 2,40±0,04 2,60±0,06 4,40±0,06 4,20±0,04 Количество базофилов за 25-30 дней до родов (до введения иммуномодулирующего средства) составляло 1,90±0,08%. После трехкратного введения иммуномодулирующего средства согласно методике исследований за 5 дней до родов в крови коров опытных групп: первой - 1,60±0,06%; второй - 1,20±0,05%; третьей - 1,60±0,05%; в крови коров контрольной группы - 1,80±0,06%, что на 0,2; 0,6; 0,4%, соответственно, больше, чем в крови коров опытных групп. Таблица 3 Показатели естественной резистентности организма коров исследуемых групп Группа животных Показатель фагоцитарная активность нейтрофилов, % бактерицидная активность, % лизоцимная активность, % До введения препарата за 25-30 дней до отела Все группы животных 53,30±0,08 50,40±0,21 15,41±0,19 За 5 дней до родов контрольная 64,05±0,35 58,18±0,18 16,43±0,14 опытная-1 66,25±0,28** 55,04±0,19 17,69±0,17 опытная-2 68,72±0,21** 59,13±0,14* 19,83±0,13** опытная-3 69,01±0,31** 59,06±0,20* 18,87±0,18* Через 5 дней после отела контрольная 62,24±0,25 52,23±0,29 15,38±0,24 опытная-1 65,05±0,31* 53,48±0,31 16,34±0,30 опытная-2 68,14±0,36** 58,62±0,25** 19,66±0,28** опытная-3 68,20±0,41** 58,47±0,30** 19,70±0,33** Содержание эозинофилов в крови коров за 25-30 дней до родов составило 4,25±0,09%, что больше, чем за 5 дней до отела, по сравнению с показателем контрольной группы на 0,25%, по сравнению с показателем опытных групп: первой - на 0,45%, второй - на 1,25%; третьей - на 0,65%. В крови коров, которым не вводили иммуномодулирующее средство (коровы контрольной группы), за 5 дней до отела наблюдалось повышенной содержание палочкоядерных и юных нейтрофилов, что указывает на напряженное состояние иммунной системы, оно подтверждается низким содержанием сегментоядерных нейтрофилов. Содержание сегментоядерных нейтрофилов в крови животных контрольной группы, по сравнению с показателем первой опытной группы, меньше на 0,20%, второй опытной группы - на 4,40%, третьей - 2,80%. Количество моноцитов в крови коров контрольной группы снизилось до 2,80%, количество лимфоцитов увеличилось на 7,35%. На 5 день после отела показатели морфологического состава крови у животных опытных групп (содержание форменных элементов), характеризующие иммунный статус коров, превосходят таковые контрольной группы. Так, количество сегментоядерных нейтрофилов в крови животных второй и третьей опытных групп на 5,8, 5,6%, моноцитов - на 2,0 и 1,8%, соответственно, больше, чем в крови коров контрольной группы. В контрольной группе показатели естественной резистентности организма коров за 25-30 дней до родов составили: фагоцитарная активность - 53,30±0,28%; бактерицидная активность - 50,40±0,21; лизоцимная активность - 15,41±0,39%. У животных контрольной группы за 5 дней до родов произошло увеличение фагоцитарной активности нейтрофилов на 11,02%; бактерицидной активности - на 2,78%; лизоцимной активности - на 1,08%, что указывает на влияние беременности на показатели естественной резистентности организма перед родами. Активизация показателей иммунной защиты организма коров зависит от дозы введенного иммуномодулирующего средства. Градиента фагоцитарной активности нейтрофилов за 5 дней до родов в крови коров контрольной группы на 2,20% меньше, чем в крови коров первой опытной группы и на 4,67, 4,96% меньше, чем в крови коров второй и третьей опытных групп, соответственно. Фагоцитарная активность нейтрофилов после родов снижается у коров всех исследуемых групп. Наибольшее снижение на 5 день после отела отмечено у животных контрольной группы и составило 62,24±0,25%, что на 1,81% меньше, чем за 5 дней до родов. У животных опытных групп показатель естественной резистентности составил: первой опытной группы - 65,05±0,31%; второй опытной группы - 68,14±0,36%; третьей опытной группы - 68,20±0,41%. Бактерицидная активность сыворотки крови за 5 дней до родов у коров опытных групп больше, чем у коров контрольной (53,18±0,18%): первой - на 1,86, второй - на 5,95; третьей - на 5,88%. Показатель бактерицидной активности сыворотки крови также имеет тенденцию снижения после родов у коров всех исследуемых групп, но у животных опытных групп данная градиента больше, чем в контрольной группе: первой опытной группы - на 1,25%; второй опытной группы - на 6,39%; третьей опытной группы - на 6,24% (разница значимо достоверна (Р<0,01) между контролем и второй, третьей опытными группами). Лизоцимная активность за 25-30 дней до родов составила 15,41±0,19%, что меньше, чем в контроле, за 5 дней до родов на 1,08%. После введения коровам опытных групп согласно методике исследований иммуномодулирующего средства показатели лизоцимной активности сыворотки крови за 5 дней до родов достоверно значимо увеличились у коров второй и третьей групп - на 3,41% (Р<0,01) и на 2,42% (Р<0,05), соответственно. Показатель лизоцимной активности сыворотки крови на 5 день после отела составил в третьей опытной группе 19,70±0,33%, что на 0,04% больше, чем во второй опытной группе (Р>0,05) (разница не достоверна). Лизоцимная активность сыворотки крови в контрольной группе меньше, чем в первой, на 0,96% (Р>0,05), чем во второй - на 4,28%; чем в третьей - на 4,32% (разница значимо достоверна, Р<0,01). Снижение иммунологического статуса коров перед родами свидетельствует о нарушении обмена веществ, что по мнению А. В. Воробьева [2] и В. Ф. Дегай [5] является основной этиологией послеродовых осложнений. Заключение. Иммуномодулирующее средство в дозе 6,0 мл внутримышечно за 25-30 дней до родов трехкратно с интервалом в 7 дней и однократно после отела через 8-12 часов способствует снижению за 5 дней до родов палочкоядерных нейтрофилов от 3,2 до 1,6%, юных нейтрофилов - от 1,4 до 0,6%, лимфоцитов - от 56,0 до 53,6% и увеличению сегментоядерных нейтрофилов - от 30,8 до 35,2%, моноцитов - от 2,8 до 4,8%. Показатели естественной резистентности организма коров второй опытной группы за 5 дней до родов имели большую величину по сравнению с этими показателями организма коров контрольной группы: по фагоцитарной активности нейтрофилов на 4,67%, по бактерицидной активности - на 5,95%, по лизоцимной активности - на 3,41%. После отела показатели морфологического состава крови и естественной резистентности организма коров, характеризующие их иммунологический статус по содержанию сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов, градиент естественной резистентности организма, были достоверно больше у коров, которым вводили иммуномодулирующее средство в дозе 6,0 мл, по сравнению с этими показателями организма коров контрольной группы. Между группами животных, которым вводили иммуномодулирующее средство в дозе 6,0 и 8,0 мл, достоверной разницы не отмечено. Использование иммуномодулирующего средства в дозе 6,0 мл внутримышечно трехкратно с интервалом в 7 дней за 25-30 дней до родов и однократно через 8-12 часов после родов обеспечивает повышение показателей иммунологического статуса организма коров перед родами и в послеродовой период.

About the authors

S. A. Baimisheva

FSBEI HE Samara SAU

Email: kitaewa.s@Yandex.ru
Graduate Student of the department «Anatomy, Obstetrics and Surgery» Samara region, settlement Ust-Kinelsky

References

Supplementary files